摘要:
目的 观察大蒜素是否能够通过增强转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达抑制血管平滑肌细胞的增殖。
方法 构建表达TGF-β1 siRNA的载体、转染平滑肌细胞,通过RT-PCR和Western Blot观察TGF-β1的表达情况;通过MTT比色法检测空白组、TGF-β1 siRNA、大蒜素10μg/ml+TGF-β1 siRNA组和大蒜素10μg/ml组在24 h,48 h和72 h内对平滑肌细胞增殖的影响;通过Western Blot检测各组在48 h后TGF-β1、激活蛋白-1(AP1)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况;通过对细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)生成的检测观察各组在作用48 h后血管壁氧化应激反应情况。
结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示TGF-β1 siRNA明显下调TGF-β1的表达;与其他组相比Allicin组细胞的生长显著降低(
P< 0.05),并且随时间的延长抑制作用明显加大,抑制率分别为25.13%、33.12%和43.05%;Western blot检测结果显示与其他组相比大蒜素组TGF-β1表达明显增强,而增殖相关基因AP1和PCNA的表达明显被抑制;作用48 h大蒜素组细胞内ROS为64,与其他组相比大蒜素组ROS生成明显降低。
结论 大蒜素可以通过增强TGF-β1的表达抑制平滑肌细胞增殖。