高级检索

CXC趋化因子受体1/2在急性白血病中的异常表达及临床意义探析

刘彦权, 曾敏娟, 殷悦, 沈建箴, 唐焕文

刘彦权, 曾敏娟, 殷悦, 沈建箴, 唐焕文. CXC趋化因子受体1/2在急性白血病中的异常表达及临床意义探析[J]. 解放军医学院学报, 2023, 44(3): 213-219. DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2023.03.002
引用本文: 刘彦权, 曾敏娟, 殷悦, 沈建箴, 唐焕文. CXC趋化因子受体1/2在急性白血病中的异常表达及临床意义探析[J]. 解放军医学院学报, 2023, 44(3): 213-219. DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2023.03.002
shu
LIU Yanquan, ZENG Minjuan, YIN Yue, SHEN Jianzhen, TANG Huanwen. Abnormal expression and clinical significance of CXC chemokine receptor 1/2 in acute leukemia[J]. ACADEMIC JOURNAL OF CHINESE PLA MEDICAL SCHOOL, 2023, 44(3): 213-219. DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2023.03.002
Citation: LIU Yanquan, ZENG Minjuan, YIN Yue, SHEN Jianzhen, TANG Huanwen. Abnormal expression and clinical significance of CXC chemokine receptor 1/2 in acute leukemia[J]. ACADEMIC JOURNAL OF CHINESE PLA MEDICAL SCHOOL, 2023, 44(3): 213-219. DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2023.03.002
shu

CXC趋化因子受体1/2在急性白血病中的异常表达及临床意义探析

  • 1.

    广东医科大学第一临床医学院血液内科，广东东莞　523808

  • 2.

    广东医科大学基础医学院解剖学教研室，广东东莞　523808

  • 3.

    福建省血液病研究所，福建医科大学附属协和医院血液科，福建福州　350001

基金项目: 国家自然科学基金面上项目(82073582)；广东省教育厅高校特色创新项目(2020KTSCX048)；广东医科大学学科建设项目(4SG22003G；4SG21209G)；广东医科大学科技创新专项计划项目(4SG22046G)
详细信息
    作者简介:

    刘彦权，男，博士，主治医师，讲师。研究方向：血液肿瘤与罕见病的科研、临床及高等医学教育研究。Email: doctorliuyanquan@163.com

    通讯作者:

    唐焕文，男，博士，教授，院长，博士生导师。Email: thw@gdmu.edu.cn

  • 中图分类号: R733.71

Abnormal expression and clinical significance of CXC chemokine receptor 1/2 in acute leukemia

  • 1.

    Department of Hematology, the First Clinical Medical College of Guangdong Medical University, Dongguan 523808, Guangdong Province, China

  • 2.

    Department of Anatomy, School of Basic Medicine, Guangdong Medical University, Dongguan 523808, Guangdong Province, China

  • 3.

    Fujian Institute of Hematology, Department of Hematology, Fujian Medical University Union Hospital, Fuzhou 350001, Fujian Province, China

More Information

HTML全文

    摘要
  • 摘要:
      背景  CXCR家族已成为恶性肿瘤领域的研究热点，积极寻找并探究与急性白血病(acute leukemia，AL)发生、发展及预后相关的CXCR家族成员，在抗白血病基础研究与临床诊疗中具有重要意义。
      目的  探索骨髓微环境中CXC趋化因子受体1/2(CXC chemokine receptor 1/2，CXCR1/2)在AL患者骨髓单个核细胞中的表达水平及其与AL患者临床特征、疗效及预后的关系，为寻找AL的治疗靶点和病情监测提供新方向。
      方法  收集2018年11月- 2020年12月福建医科大学附属协和医院86例初诊(new-diagnosed，ND) AL患者骨髓标本同时收集26例健康者标本，其中男性17例，女性9例，中位年龄36.5(范围：23 ~ 49)岁。采用qRT-PCR技术检测两组人群骨髓单个核细胞中CXCR1/2表达。以CXCR1/2中位表达水平(Expressionmedian)作为界值，将ND-AL患者分为CXCR1/2高表达组和低表达组，分析不同CXCR1/2表达水平与AL患者临床特征及指标之间的关系和临床意义。
      结果  86例ND-AL患者中，包括29例急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)患者和57例急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)患者。AL组中CXCR1[Md(IQR): 0.691(0.176 ~ 2.14) vs 0.278(0.088 ~ 0.613)， P＜0.05]、CXCR2相对表达量[Md (IQR):1.938(0.729 ~ 3.681) vs 0.419(0.079 ~ 1.268)， P＜0.01]均高于健康对照组，AML组与ALL组的CXCR1/2相对表达量差异无统计学意义(P＞0.05)；CXCR1/2的高表达与AL不良临床特征和指标有关(P＜0.05)，易出现髓外浸润、复发难治等不良结局。
      结论  AL患者的CXCR1/2表达上调，其对于AL的病情监测有一定的参考价值。
    Abstract:
      Background  CXCR family has become a research hotspot in the field of malignant tumors. Actively searching and exploring CXCR family members that are closely related to the occurrence, development and prognosis of acute leukemia (AL) are of great practical significance in the basic research and clinical diagnosis and treatment of anti-leukemia.
      Objective  To explore the expression level of CXC chemokine receptor 1/2 (CXCR1/2) under bone marrow microenvironment in bone marrow mononuclear cells of patients with AL, and analyze the relationship between CXCR1/2 expression and clinical characteristics, curative effect and prognosis of AL patients, so as to provide a new direction for the therapeutic target and disease monitoring of AL.
      Methods  Bone marrow specimens from 86 newly-diagnosed (ND) AL patients from November 2018 to December 2020 in Fujian Medical University Union Hospital were collected, including 49 males and 37 females, with a median age of 48 years (range: 17-73 years); At the same time, 26 healthy samples were collected, including 17 males and 9 females, with a median age of 36.5 years (range: 23-49 years). And quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) technology was used to detect the expression level of CXCR1/2. Taking the median expression level of CXCR1/2 as the cut-off value, the ND-AL patients were divided into CXCR1/2 high expression group and low expression group, and the relationship between different CXCR1/2 expression levels and various clinical characteristics, indicators and clinical significance of AL patients were analyzed respectively.
      Results  Among the 86 ND-AL patients included in this study, there were 29 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and 57 patients with acute myeloid leukemia (AML). The relative expression levels of CXCR1(Md[IQR]: 0.691 [0.176-2.140] vs 0.278 [0.088-0.613], P＜0.05) and CXCR2 (Md[IQR]: 1.938 [0.729-3.681] vs 0.419 [0.079-1.268], P＜0.01) in the AL group were higher than those in the healthy control group; there was no significant difference in the relative expression of CXCR1/2 between the AML group and the ALL group (P＞0.05). The high expression of CXCR1/2 was associated with adverse clinical features and indicators of AL (P＜0.05), and was prone to have adverse outcomes such as extramedullary infiltration, relapse and refractory.
      Conclusion  CXCR1/2 is up-regulated in AL, which has important reference value for the disease detection of AL.
    • HTML全文

  • 急性白血病(acute leukemia，AL)是一类高度异质性、源自造血干祖细胞遗传突变所致的恶性克隆性非实体肿瘤，AL通常病情危重、预后差、治疗难度大、复发率高，是一类难以治愈且严重威胁国人生命健康的恶性血液病[1-2]。CXC趋化因子受体(CXC chemokine receptor，CXCR)及其配体之间的相互作用及其复杂的调控网络对肿瘤的发生、发展产生影响，其中就包括了白血病细胞的激活、增殖和侵袭[3]。CXCR家族由CXCR1 ~ CXCR7所组成，CXCR1和CXCR2是CXC趋化因子配体白细胞介素8(CXC chemokine ligand 8，CXCL8)最具亲和力且重要的受体，该“受体-配体”相互作用可诱导白细胞趋化性，进而引起细胞增殖和迁移，并与肿瘤恶性生物学行为调控机制密切相关[4]。目前已知，靶向CXCL8-CXCR1/2轴在多种实体瘤中具有较大治疗潜力[5-7]，但其在AL中的作用却鲜为人知。本研究通过探索CXCR1/2在初诊(new-diagnosed，ND) AL患者中的表达情况，分析并探讨AL患者CXCR1/2表达与临床指标、预后的关系，旨在为AL的基础研究与治疗靶点探寻提供较为新颖的方向，为改善AL患者的生存质量、远期疗效及长期预后提供新思路。

    对象与方法

    1   研究对象

    收集2018年11月- 2020年12月福建医科大学附属协和医院血液科住院部、门诊骨髓穿刺室共86例初诊AL患者的临床资料及骨髓血标本，其中男性49例，女性37例，年龄17 ~ 73岁，中位年龄48岁。所有患者均根据临床表现、血常规检查和骨髓MICM国际分型诊断标准予以分型。同时收集26例临床诊断无血液病或其他恶性疾病的健康者骨髓血标本作为正常对照组，其中男性17例，女性9例，年龄23 ~ 49岁，中位年龄36.5岁。本研究经福建医科大学附属协和医院医学伦理委员会批准(伦理编号：2019KY092)，入组本研究的患者均签署知情同意书，临床资料从病历系统资料中获取。入组研究的患者和对照者均在行骨髓穿刺术时留取3 ~ 5 mL骨髓液，并用肝素抗凝管抗凝。

    2   主要仪器与试剂

    超净台购于苏州安泰空气技术有限公司，微量移液器购于德国Eppendorf公司，荧光实时定量PCR仪(7500型)购于美国ABI公司，恒温水浴箱购于英国Grant公司，高速台式离心机购于上海金鹏分析仪器有限公司，低温高速离心机购于美国Thermo公司，-20℃低温冰箱购于中国美的公司，-80℃低温冰箱、生物安全柜购于美国Thermo公司；15 mL离心管、10 mL移液管购于美国Thermo公司，巴氏吸管购于NEST公司，1.5 mL EP管、PCR管、八联管均购于Axygen公司；PBS缓冲液购于Hyclone公司，人淋巴细胞分离液购于厦门鹭隆生物公司，红细胞裂解液购于北京索莱宝生物公司，TRIzol试剂购于上海Invitrogen公司，氯仿、异丙醇、无水乙醇均购于上海振兴化工，焦碳酸二乙酯(DEPC)购于上海生工公司，逆转录试剂盒购于南京诺唯赞公司，SYBR GreenMaster (ROX)购于北京康为世纪生物公司。

    3   骨髓标本单个核细胞的提取

    将骨髓血标本加入等体积淋巴细胞分离液至15 mL离心管(骨髓液∶分离液＝1∶1)，等量PBS稀释骨髓标本，轻柔吹打混匀；将稀释的骨髓缓慢叠加于人淋巴细胞分离液，形成分明的界限；室温下2000 r/min离心20 min，用移液管吸取上层血浆冻存以备后续ELISA实验，吸取中间云雾状层单个核细胞层于1.5 mL EP管中，PBS洗涤两遍后2000 r/min离心5 min，若存在较多红细胞，则加入红细胞裂解液2 mL，4℃裂解20 min，再用PBS洗涤两遍；吸弃上清，加入1 mL TRIzol以备后续提取RNA，储藏于-80℃。

    4   骨髓单个核细胞总RNA的提取

    在骨髓标本处理后获取的单个核细胞团加入1 mL TRIzol试剂混匀，冰上静置10 min后加入氯仿200 μL，充分震荡混匀3 min，冰上静置5 min后于4℃下12000 r/min水平离心15 min，离心后吸取上层清液到另一预先对应编号的EP管中，加入等体积异丙醇，颠倒混匀，碎冰上静置10 min，静置后于4℃下12000 r/min水平离心20 min，弃上清，加入无水乙醇1 mL，温和震荡离心管，轻弹管底，使沉淀悬浮，再于4℃下12000 r/min水平离心10 min，弃上清，加入适量DEPC水(10 ~ 20 μL)，56℃水浴10 min，溶解RNA，吸取2 μL RNA于核酸蛋白定量仪中测定浓度和纯度，-80℃冻存备用。

    5   实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CXCR1/2的表达水平

    利用TRIzol RNA提取试剂盒提取总RNA并检测浓度和纯度后，按照南京诺唯赞逆转录试剂盒说明书逆转录成cDNA，应用ABI 7500型荧光定量PCR仪和SYBR GreenMaster (ROX)试剂盒进行PCR 扩增，以GAPDH为内参照，引物序列如下。CXCR1引物序列：上游引物5’-TTCTCCATAGCTGCCTCAACC-3’，下游引物5’-TGTAGGAGGTAACACGATGACG-3’；CXCR2引物序列：上游引物5’-TGGGCAACAATACAGCAAACT-3’，下游引物5’-GCACTTAGGCAGGAGGTCTTA-3’；GAPDH引物序列：上游引物5’-CACCCACTCCTCCACCTTTGA-3’，下游引物5’-TCTCTCTTCCTCTTGTGCTCTTGC-3’。总反应体系20 µL：2 µL cDNA，10 µL SYBR Green (ROX)，上、下游引物各0.5 µL，RNase-free ddH2O 7 µL。反应条件如下，第一阶段(预变性)：50℃ 2 min、95℃ 10 min，1个循环；第二阶段：95℃ 15 s (变性)、60℃ 1 min (退火/延伸)，共40个循环；第三阶段(溶解曲线分析)：95℃ 15 s、60℃ 1 min、95℃ 30 s、60℃ 15 s，1个循环；采用Ct值比较法予qRT-PCR结果分析，并对比各CXCR家族mRNA表达水平，即ΔCt＝CtCXCR - CtGAPDH，采用2-ΔΔCT法计算各CXCR的相对表达量，其中ΔΔCT＝(CTCXCR - CTGADPH)实验组 - (CTCXCR - CTGADPH)对照组。

    6   研究指标

    (1)比较初诊AL患者与健康者骨髓标本中的CXCR1/2 mRNA表达水平；(2)以CXCR1/2中位表达水平作为界值，将初诊AL患者分为CXCR1/2高表达组和CXCR1/2低表达组，分析不同CXCR1/2表达水平与AL患者临床特征的关系；(3)分析57例AML患者CXCR1、CXCR2表达与临床特征及指标之间的关系。

    7   统计学方法

    采用SPSS 26.0软件进行统计分析。计量资料进行正态性检验，正态分布数据以$\bar x \pm s $表示，两组间比较用t检验(或校正t检验)；非正态分布数据以Md(IQR)表示，并进行非参数检验。等级资料采用秩和检验。分类计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

    结　果

    1   临床AL标本分型

    如表1所示，本研究纳入的初诊AL患者86例，其中急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)组29例(T型ALL约1/4，B型ALL约3/4)，急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)组57例(M2和M5型占AML组的73.68%)。

    表  1  临床AL标本分型统计(例，%)
    Table  1.  Classification and statistics of clinical AL specimens (n, %)
    　分型ALL (n=29)AML (n=57)
    　T7(24.14)
    　B22(75.86)
    　M02(3.51)
    　M11(1.75)
    　M219(33.33)
    　M310(17.54)
    　M42(3.51)
    　M523(40.35)
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    2   CXCR1/2在初诊AL组与健康对照组中的表达比较

    以本研究样本CXCR1/2水平数据绘制数据图(图1)。其中左两数据簇分别为健康对照组(26例)和初诊AL组(86例)。右两数据簇则为初诊AL组的两分型组，分别为AML组(57例)和ALL组(29例)。

    图  1  CXCR1、CXCR2在初诊AL组(含分组)与健康对照组中的表达比较
    Figure  1.  Differences in the relative expression of CXCR1 and CXCR2 in newly diagnosed AL groups and healthy control group
    下载: 全尺寸图片 幻灯片

    如图1所示，CXCR1在初诊AL组中的中位相对表达量为0.691(0.176 ~ 2.14)，在健康对照组中的中位相对表达量为0.278(0.088 ~ 0.613)；而CXCR2在初诊AL组中的中位相对表达量为1.938(0.729 ~ 3.681)，在健康对照组中的中位相对表达量为0.419(0.079 ~ 1.268)，两者比较差异有统计学意义(P＜0.01)。此外，CXCR1、CXCR2在AML组中的中位相对表达水平分别为0.704、1.965，AML组与ALL组的CXCR1/2表达水平差异无统计学意义(P＞0.05)。

    3   初诊AL患者CXCR1/2表达与临床特征的关系

    CXCR1高表达组(ExpressionCXCR1≥0.691)的白细胞(white blood cell，WBC)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)、C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)等炎症指标均显著高于低表达组(ExpressionCXCR1＜0.691)(P＜0.05)，且CXCR1表达与患者初次就诊时是否发热、皮肤苍白、血红蛋白(hemoglobin，Hb)、血小板(platelet，PLT)、骨髓及外周血原始细胞数等临床特征与指标有关(P＜0.05)，与患者的年龄、性别、疲劳程度、髓外浸润情况等无关(P＞0.05)。见表2。

    表  2  AL患者CXCR1、CXCR2表达与临床特征的关系
    Table  2.  Relationship between CXCR1/2 expression and clinical characteristics in AL patients
    　　指标CXCR1χ2/t/Z值P值CXCR2χ2/t/Z值P值
    CXCR1表达
    ＜0.691 (n=37)    		CXCR1表达
    ≥0.691 (n=49)    		表达
    ＜1.938 (n=34)    		表达
    ≥1.938 (n=52)
    性别(男/女)/例21/1628/210.0010.97119/1530/220.0270.868
    年龄/[岁，Md(IQR)]42.0(17.0，64.0)51.0(26.0，73.0)2.0000.05445.0(17.0，62.0)57.0(23.0，73.0)2.3590.024
    发热/(例，%)17(45.95)41(83.67)13.666＜0.00115(44.12)45(81.82)17.539＜0.001
    疲惫/(例，%)26(70.27)37(75.51)0.2950.58724(70.59)47(85.45)5.5950.018
    苍白/(例，%)23(62.16)46(93.88)13.370＜0.00119(55.88)51(92.73)24.170＜0.001
    白细胞计数/(L-1，× 109)12.64 ± 7.4123.42 ± 6.257.309＜0.00116.53 ± 4.2925.91 ± 6.478.084＜0.001
    血红蛋白/(g·L-1)83.41 ± 6.1872.37 ± 9.476.525＜0.00179.46 ± 6.3267.95 ± 8.246.918＜0.001
    血小板计数/(L-1，× 109)77.21 ± 3.6852.93 ± 7.1420.474＜0.00174.79 ± 3.6865.93 ± 7.627.198＜0.001
    乳酸脱氢酶/(U·L-1)397.43 ± 29.43474.24 ± 64.177.410＜0.001406.43 ± 32.51512.96 ± 43.9512.897＜0.001
    C反应蛋白/(mg·L-1)32.94 ± 9.3558.85 ± 16.389.255＜0.00129.94 ± 8.1663.25 ± 12.9314.645＜0.001
    降钙素原/[ng·mL-1，Md(IQR)]0.25(0.04，1.32)0.38(0.03，2.29)-0.3700.7120.21(0.03，1.04)0.35(0.02，2.51)-0.2000.835
    骨髓原始细胞数/%49.42 ± 9.3954.39 ± 6.772.7280.00852.46 ± 8.5367.39 ± 5.199.158＜0.001
    外周血原始细胞数/%41.23 ± 5.1245.66 ± 7.613.2220.00243.23 ± 4.6349.23 ± 6.894.830＜0.001
    肝脾大/(例，%)12(32.43)29(59.18)6.0480.01411(32.35)36(65.45)11.2810.001
    淋巴结肿大/(例，%)8(21.62)15(30.61)0.8700.3519(26.47)23(41.82)2.7750.096
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    CXCR2高表达组(ExpressionCXCR2≥1.938)患者WBC、LDH、CRP炎症指标以及骨髓原始细胞数、外周血原始细胞数均显著高于低表达组(ExpressionCXCR2＜1.938)(P＜0.05)、Hb、PLT显著低于低表达组(P＜0.05)。此外，CXCR2的表达与发热、疲劳、皮肤苍白等临床特征密切关联(P＜0.05)，CXCR2高表达患者相比低表达患者更易出现髓外浸润(P＜0.05)。 CXCR2的表达与患者的性别、PCT、淋巴结肿大等无关(P＞0.05)。

    4   初诊AL样本中AML患者CXCR1/2表达与临床指标的关系

    CXCR1高表达组(ExpressionCXCR1≥0.704)中M2和M5患者居多，占全部AML分型的80%以上，且CXCR1的表达与患者贫血程度、WBC、PLT、骨髓原始细胞数目密切相关(P＜0.05)，与性别、年龄、FAB分型、髓外浸润情况、细胞遗传学危险分组及分子遗传学特征无关(P＞0.05)。见表3。

    表  3  AML患者CXCR1、CXCR2表达与临床指标的关系
    Table  3.  Relationship between the expression of CXCR1, CXCR2 and clinical indicators in the AML patients
    　指标CXCR1χ2/t值P值CXCR2χ2/t值P值
    表达＜0.704 (n=24)表达≥0.704 (n=33)表达＜1.965 (n=22)表达≥1.965 (n=35)
    性别(男/女)/例16/815/182.5200.11213/918/170.3200.572
    年龄/(例，%)1.7330.1883.4070.065
    　＜60岁22(91.67)26(78.79)21(95.45)27(77.14)
    　≥60岁2(8.33)7(21.21)1(4.55)8(22.86)
    FAB分型/(例，%)7.0200.21924.560＜0.001
    　M00(0)2(6.06)1(4.55)1(2.86)
    　M11(4.17)0(0)1(4.55)0(0)
    　M26(25.00)13(39.39)11(50.00)8(22.86)
    　M37(29.17)3(9.09)8(36.36)2(5.71)
    　M41(4.17)1(3.03)0(0)2(5.71)
    　M59(37.5)14(42.42)1(4.55)22(62.86)
    　M60(0)0(0)0(0)0(0)
    　M70(0)0(0)0(0)0(0)
    白细胞/(L-1，× 109)11.73 ± 3.2820.91 ± 5.927.470＜0.00115.46 ± 6.1921.72 ± 4.874.251＜0.001
    血红蛋白/(g·L-1)81.62 ± 7.1369.72 ± 4.957.036＜0.00185.53 ± 7.4171.54 ± 6.397.564＜0.001
    血小板/(L-1，× 109)83.49 ± 9.3662.43 ± 6.879.805＜0.00166.74 ± 5.3849.95 ± 5.0611.903＜0.001
    骨髓原始细胞数/%52.81 ± 6.9265.83 ± 7.496.688＜0.00156.36 ± 8.5367.61 ± 7.985.046＜0.001
    髓外浸润/(例，%)5(20.83)11(33.33)1.0750.3004(18.18)12(34.29)1.7350.188
    核型/(例，%)5.5280.47812.6980.048
    　正常11(45.83)16(48.48)7(31.81)20(57.14)
    　复杂1(4.17)5(15.15)1(4.55)5(14.29)
    　t (15; 17)7(29.17)3(9.09)8(36.36)2(5.71)
    　t (8; 21)1(4.17)2(6.06)2(9.09)1(2.86)
    　inv (16)1(4.17)1(3.03)1(4.54)1(2.86)
    　t (9; 22)1(4.17)1(3.03)0(0)2(5.71)
    　数据缺失或其他2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    细胞遗传学/(例，%)2.8000.4246.0300.110
    　低危9(37.5)7(21.21)10(45.45)6(17.14)
    　中危11(45.83)15(45.45)7(31.82)19(54.29)
    　高危2(8.33)6(18.18)2(9.09)6(17.14)
    　数据缺失2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    突变基因/(例，%)7.6800.7428.8210.638
    　CEBPA (+)7(29.16)3(9.09)6(27.27)4(11.43)
    　FLT3-ITD (+)5(20.83)14(42.42)5(22.73)14(40.00)
    　NPM1 (+)3(12.5)5(15.15)5(22.73)3(8.57)
    　c-kit (+)1(4.17)3(9.09)1(4.55)3(8.57)
    　RUNX1 (+)1(4.17)4(12.12)2(9.09)3(8.57)
    　ASXL1 (+)2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    　DNMT3A (+)2(8.33)4(12.12)2(9.09)4(11.43)
    　IDH1/2 (+)2(8.33)3(9.09)3(13.64)2(5.71)
    　NRAS or KRAS (+)3(12.5)8(24.24)2(9.09)9(25.71)
    　TET2 (+)2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    　EZH2 (+)1(4.17)3(9.09)1(4.55)3(8.57)
    　数据缺失2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    CXCR2高表达组(ExpressionCXCR2≥1.965)中M2和M5亦占全部AML分型的80%以上，其他分型在高表达组与低表达组之间无统计学差异(P＞0.05)，CXCR2的表达与患者性别、髓外浸润情况、细胞遗传学危险分层和分子生物学特征无关(P＞0.05)，但CXCR2高表达患者较低表达患者更易出现较差的实验室检查结果(P＜0.05)。

    讨　论

    AL是一类源自淋巴造血系统且高度异质性的非实体性恶性肿瘤，尽管标准诱导化疗联合靶向药物、免疫治疗、骨髓移植等手段可使部分AL患者改善病情、延长生命，但AL临床疗效及预后不容乐观，病死率仍居高不下[8-9]。根据世卫组织国际癌症研究机构(IARC)和中国国家癌症中心(NCC)的最新数据，2020年中国新发癌症人数、癌症死亡人数均位居全球第1，其中白血病死亡人数位居全球所有癌症第10位；在我国，白血病位居男性癌症发病率的第7位，分别是我国城市地区癌症高发及癌症病死率的第5位、第4位恶性肿瘤，且白血病位居我国所有癌症死亡总数中的第9位，是目前严重威胁国人生命健康且难以治愈的恶性疾病[10-11]。为此，积极寻找AL新治疗靶点，寻求对AL诊断、治疗及预后评估有价值的分子标志物尤为重要。

    趋化因子是一类由基质细胞或肿瘤细胞所产生的可移动趋化的小分子分泌型蛋白，根据其分子结构，学术界将趋化因子分为CXC、CC、CX3C及C四大类别，而趋化因子受体作为G蛋白偶联受体超家族的关键成员，基于趋化因子配体可将其分为CXCR、CCR、CX3CR 和CR这四类[12-14]。趋化因子与其受体相结合后通过激活相关信号通路等在内的生物学机制调控肿瘤细胞的增殖、转移或影响机体免疫反应从而介导肿瘤的发生发展。CXCR1/2作为G蛋白偶联受体超家族的关键成员，其亦是CXC趋化因子配体8(CXCL8)极具亲和力的受体，CXCR1与CXCR2彼此具有76%的同源性序列，CXCL8通过与CXCR1/2结合共同组成复杂的调控网络在机体免疫、肿瘤微环境等方面扮演着不可或缺的角色[15-16]。既往研究证实，CXCR1/2在多种恶性肿瘤中异常表达，并在促进肿瘤化疗耐药、转移以及维持肿瘤干细胞特性等方面尤为关键[17-18]。但目前对于CXCR1/2在血液系统肿瘤的发生发展中是否存在一定的调控关系或作用机制等相关研究甚少，其很有可能成为白血病临床诊疗的新型标志物。

    本研究采用qRT-PCR技术检测86例ND-AL患者及26例健康对照者骨髓血标本中CXCR1/2的表达情况，结果表明CXCR1/2在AL患者中表达上调，利用CXCR1/2相对表达量中位数法(Expressionmedian)将所有病例标本分为CXCR1/2高表达组和CXCR1/2低表达组，结果显示CXCR1高表达组WBC、LDH、CRP以及某些炎症指标均显著高于低表达组，且CXCR1的表达与患者初次就诊时是否发热、皮肤苍白、WBC、Hb、PLT、LDH、CRP、骨髓及外周血原始细胞数等临床特征与指标有关，与患者的年龄、性别、疲劳程度、髓外浸润情况等无关。而CXCR2的表达与发热、疲劳、皮肤苍白等临床特征相关，且CXCR2高表达组WBC、LDH、CRP炎症指标以及骨髓原始细胞数、外周血原始细胞数均显著高于低表达组，而Hb、PLT显著低于低表达组，此外CXCR2高表达患者相比CXCR2低表达患者更易出现髓外浸润，CXCR2的表达与患者的性别、PCT以及淋巴结肿大等无关。上述结果提示，CXCR1/2高表达与临床不良症状、体征以及较差的实验室结果密切相关，间接提示CXCR1/2可能参与了AL的发生发展致病机制，且很有可能与AL患者的病情发展、疗效欠佳及预后不良等密切相关。

    由于AML是成年人最常见的白血病类型，为了更细致地探索CXCR1/2在白血病中的异常表达与临床特征的关联，本研究后续将纳入本研究所有临床样本中诊断为AML的57例患者数据单独进行研究，探讨AML患者CXCR1/2表达情况与各临床指标及特征的关联。结果发现，CXCR1/2表达在FAB分型中存在一定关联和特点，在CXCR1、CXCR2高表达组中均以M2和M5患者居多，分别占全部AML(FAB)分型的81.81%、85.72%。此外，CXCR1/2高表达患者贫血、出血、感染及髓外浸润等风险与低表达患者相比更为严重，表明CXCR1/2与不良临床指标关系紧密相关，CXCR1/2很有可能作为ND-AL患者，尤其是AML患者疗效及预后的重要评估指标。值得关注的是，Tang等[19]亦采用qRT-PCR技术检测ND-AML患者体内CXCR2表达情况，发现AML患者CXCR2高表达预示着长期生存率低，是预后不良的独立危险因素，且CXCR2高表达提示易发生白血病髓外浸润，本研究与该研究结论基本一致。

    本研究的创新之处是将基础研究紧密联系临床，并将基础研究成果转化付诸于临床实践。但由于本研究为单中心样本且存在纳入例数少、随访时间短等不足，今后本课题组将更为深入地开展CXCR1/2在AL中的致病机制研究，进一步揭示CXCR1/2在白血病发生发展中的关键作用。总之，本研究证实CXCR1/2在AL患者中表达上调，可作为AL患者诊疗中的重要分子标志物和生物学靶点，检测CXCR1/2 mRNA表达水平，对评估AL患者的临床疗效、预后价值等方面具有极为重要的指导意义，依据CXCR1/2表达水平可对AL患者进行个体化、精准性的分组治疗，继而最大程度改善患者预后。此外，本研究结果亦在一定层面上提示CXCR1/2在AL致病机制中起到关键作用，未来很可能是抗白血病基础研究与临床的重要突破口，并为抗白血病治疗及研究提供重要的理论基础和现实依据。

    作者贡献　刘彦权：研究设计、实验研究实施与监督、文献查阅与论据完善、撰写或修改论文；殷悦：实验技术支持、实验研究实施与监督；曾敏娟：数据统计分析与核查校对；沈建箴、唐焕文：研究指导与总体把关、经费与行政支持。

    利益冲突　所有作者均声明不存在利益冲突。

    数据共享声明　本研究相关数据暂不共享。

  • 图  1   CXCR1、CXCR2在初诊AL组(含分组)与健康对照组中的表达比较

    Figure  1.   Differences in the relative expression of CXCR1 and CXCR2 in newly diagnosed AL groups and healthy control group

    下载: 全尺寸图片 幻灯片

    表  1   临床AL标本分型统计(例，%)

    Table  1   Classification and statistics of clinical AL specimens (n, %)

    　分型ALL (n=29)AML (n=57)
    　T7(24.14)
    　B22(75.86)
    　M02(3.51)
    　M11(1.75)
    　M219(33.33)
    　M310(17.54)
    　M42(3.51)
    　M523(40.35)
    下载: 导出CSV

    表  2   AL患者CXCR1、CXCR2表达与临床特征的关系

    Table  2   Relationship between CXCR1/2 expression and clinical characteristics in AL patients

    　　指标CXCR1χ2/t/Z值P值CXCR2χ2/t/Z值P值
    CXCR1表达
    ＜0.691 (n=37)    		CXCR1表达
    ≥0.691 (n=49)    		表达
    ＜1.938 (n=34)    		表达
    ≥1.938 (n=52)
    性别(男/女)/例21/1628/210.0010.97119/1530/220.0270.868
    年龄/[岁，Md(IQR)]42.0(17.0，64.0)51.0(26.0，73.0)2.0000.05445.0(17.0，62.0)57.0(23.0，73.0)2.3590.024
    发热/(例，%)17(45.95)41(83.67)13.666＜0.00115(44.12)45(81.82)17.539＜0.001
    疲惫/(例，%)26(70.27)37(75.51)0.2950.58724(70.59)47(85.45)5.5950.018
    苍白/(例，%)23(62.16)46(93.88)13.370＜0.00119(55.88)51(92.73)24.170＜0.001
    白细胞计数/(L-1，× 109)12.64 ± 7.4123.42 ± 6.257.309＜0.00116.53 ± 4.2925.91 ± 6.478.084＜0.001
    血红蛋白/(g·L-1)83.41 ± 6.1872.37 ± 9.476.525＜0.00179.46 ± 6.3267.95 ± 8.246.918＜0.001
    血小板计数/(L-1，× 109)77.21 ± 3.6852.93 ± 7.1420.474＜0.00174.79 ± 3.6865.93 ± 7.627.198＜0.001
    乳酸脱氢酶/(U·L-1)397.43 ± 29.43474.24 ± 64.177.410＜0.001406.43 ± 32.51512.96 ± 43.9512.897＜0.001
    C反应蛋白/(mg·L-1)32.94 ± 9.3558.85 ± 16.389.255＜0.00129.94 ± 8.1663.25 ± 12.9314.645＜0.001
    降钙素原/[ng·mL-1，Md(IQR)]0.25(0.04，1.32)0.38(0.03，2.29)-0.3700.7120.21(0.03，1.04)0.35(0.02，2.51)-0.2000.835
    骨髓原始细胞数/%49.42 ± 9.3954.39 ± 6.772.7280.00852.46 ± 8.5367.39 ± 5.199.158＜0.001
    外周血原始细胞数/%41.23 ± 5.1245.66 ± 7.613.2220.00243.23 ± 4.6349.23 ± 6.894.830＜0.001
    肝脾大/(例，%)12(32.43)29(59.18)6.0480.01411(32.35)36(65.45)11.2810.001
    淋巴结肿大/(例，%)8(21.62)15(30.61)0.8700.3519(26.47)23(41.82)2.7750.096
    下载: 导出CSV

    表  3   AML患者CXCR1、CXCR2表达与临床指标的关系

    Table  3   Relationship between the expression of CXCR1, CXCR2 and clinical indicators in the AML patients

    　指标CXCR1χ2/t值P值CXCR2χ2/t值P值
    表达＜0.704 (n=24)表达≥0.704 (n=33)表达＜1.965 (n=22)表达≥1.965 (n=35)
    性别(男/女)/例16/815/182.5200.11213/918/170.3200.572
    年龄/(例，%)1.7330.1883.4070.065
    　＜60岁22(91.67)26(78.79)21(95.45)27(77.14)
    　≥60岁2(8.33)7(21.21)1(4.55)8(22.86)
    FAB分型/(例，%)7.0200.21924.560＜0.001
    　M00(0)2(6.06)1(4.55)1(2.86)
    　M11(4.17)0(0)1(4.55)0(0)
    　M26(25.00)13(39.39)11(50.00)8(22.86)
    　M37(29.17)3(9.09)8(36.36)2(5.71)
    　M41(4.17)1(3.03)0(0)2(5.71)
    　M59(37.5)14(42.42)1(4.55)22(62.86)
    　M60(0)0(0)0(0)0(0)
    　M70(0)0(0)0(0)0(0)
    白细胞/(L-1，× 109)11.73 ± 3.2820.91 ± 5.927.470＜0.00115.46 ± 6.1921.72 ± 4.874.251＜0.001
    血红蛋白/(g·L-1)81.62 ± 7.1369.72 ± 4.957.036＜0.00185.53 ± 7.4171.54 ± 6.397.564＜0.001
    血小板/(L-1，× 109)83.49 ± 9.3662.43 ± 6.879.805＜0.00166.74 ± 5.3849.95 ± 5.0611.903＜0.001
    骨髓原始细胞数/%52.81 ± 6.9265.83 ± 7.496.688＜0.00156.36 ± 8.5367.61 ± 7.985.046＜0.001
    髓外浸润/(例，%)5(20.83)11(33.33)1.0750.3004(18.18)12(34.29)1.7350.188
    核型/(例，%)5.5280.47812.6980.048
    　正常11(45.83)16(48.48)7(31.81)20(57.14)
    　复杂1(4.17)5(15.15)1(4.55)5(14.29)
    　t (15; 17)7(29.17)3(9.09)8(36.36)2(5.71)
    　t (8; 21)1(4.17)2(6.06)2(9.09)1(2.86)
    　inv (16)1(4.17)1(3.03)1(4.54)1(2.86)
    　t (9; 22)1(4.17)1(3.03)0(0)2(5.71)
    　数据缺失或其他2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    细胞遗传学/(例，%)2.8000.4246.0300.110
    　低危9(37.5)7(21.21)10(45.45)6(17.14)
    　中危11(45.83)15(45.45)7(31.82)19(54.29)
    　高危2(8.33)6(18.18)2(9.09)6(17.14)
    　数据缺失2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    突变基因/(例，%)7.6800.7428.8210.638
    　CEBPA (+)7(29.16)3(9.09)6(27.27)4(11.43)
    　FLT3-ITD (+)5(20.83)14(42.42)5(22.73)14(40.00)
    　NPM1 (+)3(12.5)5(15.15)5(22.73)3(8.57)
    　c-kit (+)1(4.17)3(9.09)1(4.55)3(8.57)
    　RUNX1 (+)1(4.17)4(12.12)2(9.09)3(8.57)
    　ASXL1 (+)2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    　DNMT3A (+)2(8.33)4(12.12)2(9.09)4(11.43)
    　IDH1/2 (+)2(8.33)3(9.09)3(13.64)2(5.71)
    　NRAS or KRAS (+)3(12.5)8(24.24)2(9.09)9(25.71)
    　TET2 (+)2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    　EZH2 (+)1(4.17)3(9.09)1(4.55)3(8.57)
    　数据缺失2(8.33)5(15.15)3(13.64)4(11.43)
    下载: 导出CSV
    • 参考文献(19)
  • [1] 刘彦权,周华蓉,付海英,等. 白血病的传统中医临床诊疗研究进展[J]. 中国医药指南,2020,18(12): 30-32.
    [2] 闫飞,魏述宁,刘佳,等. 我国北方地区成人急性白血病发病的生活及环境危险因素分析[J]. 解放军医学院学报,2021,42(5): 488-493.
    [3] 刘彦权,沈建箴. CXCR1与恶性肿瘤的相关性[J]. 国际肿瘤学杂志,2020,47(12): 732-736.
    [4]

    Ruffini PA. The CXCL8-CXCR1/2 axis as a therapeutic target in breast cancer stem-like cells[J]. Front Oncol,2019,9: 40. doi: 10.3389/fonc.2019.00040
    [5]

    Mishra A,Suman KH,Nair N,et al. An updated review on the role of the CXCL8-CXCR1/2 axis in the progression and metastasis of breast cancer[J]. Mol Biol Rep,2021,48(9): 6551-6561.
    [6]

    Han ZJ,Li YB,Yang LX,et al. Roles of the CXCL8-CXCR1/2 axis in the tumor microenvironment and immunotherapy[J]. Molecules,2021,27(1): 137.
    [7]

    Wang RX,Ji P,Gong Y,et al. Value of CXCL8-CXCR1/2 axis in neoadjuvant chemotherapy for triple-negative breast cancer patients:a retrospective pilot study[J]. Breast Cancer Res Treat,2020,181(3): 561-570.
    [8]

    Singh V,Uddin MH,Zonder JA,et al. Circular RNAs in acute myeloid leukemia[J]. Mol Cancer,2021,20(1): 149.
    [9]

    Lee JB,Vasic D,Kang H,et al. State-of-art of cellular therapy for acute leukemia[J]. Int J Mol Sci,2021,22(9): 4590.
    [10]

    IARC. Latest global cancer data: Cancer burden rises to 19.3 million new cases and 10.0 million cancer deaths in 2020. ［EB/OL］. https://www.iarc.who.int/fr/news-events/latest-global-cancer-data-cancer-burden-rises-to-19-3-million-new-cases-and-10-0-million-cancer-deaths-in-2020.
    [11] 刘彦权,沈建箴,周华蓉. 血液肿瘤表观遗传调控及其靶向治疗研究进展[J]. 解放军医学院学报,2019,40(11): 1101-1105.
    [12]

    Nagarsheth N,Wicha MS,Zou WP. Chemokines in the cancer microenvironment and their relevance in cancer immunotherapy[J]. Nat Rev Immunol,2017,17(9): 559-572.
    [13]

    Hu LT,Deng WJ,Chu ZS,et al. Comprehensive analysis of CXCR family members in lung adenocarcinoma with prognostic values[J]. BMC Pulm Med,2022,22(1): 259.
    [14]

    He JR,Jiang ZZ,Lei JW,et al. Prognostic value and therapeutic perspectives of CXCR members in the glioma microenvironment[J]. Front Genet,2022,13: 787141. doi: 10.3389/fgene.2022.787141
    [15]

    Ha H,Debnath B,Neamati N. Role of the CXCL8-CXCR1/2 axis in cancer and inflammatory diseases[J]. Theranostics,2017,7(6): 1543-1588.
    [16]

    Che JX,Song R,Chen BH,et al. Targeting CXCR1/2:the medicinal potential as cancer immunotherapy agents,antagonists research highlights and challenges ahead[J]. Eur J Med Chem,2020,185: 111853. doi: 10.1016/j.ejmech.2019.111853
    [17]

    Liu Q,Li AP,Tian YJ,et al. The CXCL8-CXCR1/2 pathways in cancer[J]. Cytokine Growth Factor Rev,2016,31: 61-71. doi: 10.1016/j.cytogfr.2016.08.002
    [18]

    Wu S,Saxena S,Varney ML,et al. CXCR1/2 chemokine network regulates melanoma resistance to chemotherapies mediated by NF-κB[J]. Curr Mol Med,2017,17(6): 436-449.
    [19]

    Tang W, Li ZY, Li X, et al. High CXCR2 expression predicts poor prognosis in adult patients with acute myeloid leukemia［J］. Ther Adv Hematol, 2020, 11: 2040620720958586.
    • 相关文章
    • 施引文献(1)

  • 期刊类型引用(1)

    1. 沈佳坤，董慧娟，郑林，颜静秀. 急性白血病患者血清TK1、IL-32、TNF-α水平及临床意义. 现代诊断与治疗. 2024(15): 2333-2334+2337 . 百度学术

    其他类型引用(0)

    • 资源附件(0)
图(1)  /  表(3)
计量
  • 文章访问数:  247
  • HTML全文浏览量:  123
  • PDF下载量:  25
  • 被引次数: 1
出版历程
  • 收稿日期:  2022-07-02
  • 网络出版日期:  2023-02-12
  • 刊出日期:  2023-03-27

目录

摘要
HTML全文

  • 对象与方法

  • 1   研究对象

  • 2   主要仪器与试剂

  • 3   骨髓标本单个核细胞的提取

  • 4   骨髓单个核细胞总RNA的提取

  • 5   实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CXCR1/2的表达水平

  • 6   研究指标

  • 7   统计学方法

  • 结　果

  • 1   临床AL标本分型

  • 2   CXCR1/2在初诊AL组与健康对照组中的表达比较

  • 3   初诊AL患者CXCR1/2表达与临床特征的关系

  • 4   初诊AL样本中AML患者CXCR1/2表达与临床指标的关系

  • 讨　论

参考文献(19)
相关文章
施引文献(1)
资源附件(0)

/

返回文章
返回
联系我们
  • 电话： (010)66936767
  • Email： xuebao301@vip.163.com
  • 地址：北京市海淀区复兴路28号 解放军总医院
下载中心
友情链接

版权所有 © 《解放军医学院学报》编辑部 京ICP备17052889号-1

本系统由北京仁和汇智信息技术有限公司开发  百度统计